2024-11-15 11:03:23
病理染色切片所用到的主要设备?生物组织包埋机 (YD-6L):用于将处理好的组织样本包埋在石蜡中,以便于后续的切片操作。?石蜡切片机 (Leica HistoCore MULTICUT):高质量的切片机,能够精确地将石蜡包埋的组织切成薄片。?正置荧光显微镜带100倍油镜 (Leica DM4000B):具备高分辨率和荧光成像功能,适用于多种显微镜观察需求。?尼康图像采集显微镜:用于捕捉和记录显微镜下的图像,便于数据保存和分析。?摊片机:用于将切片平整地放置在载玻片上,确保切片的质量和一致性。?通风橱:用于处理挥发性或有害化学品,确保实验室的安全和卫生。总之,病理染色实验室是一个多功能的设施,能够完成从样本处理到染色再到观察的全过程。配备先进的设备和技术,该实验室不仅支持常规的病理学实验,还可以进行复杂的免疫组化和特殊染色实验,为疾病诊断和科学研究提供了强有力的支持。Periodic Acid-Schiff (PAS)染色用于检测糖类物质。南京刚果红染色
3. 普鲁士蓝反应:?用蒸馏水清洗切片后,将其浸入含有亚铁**钾(K?[Fe(CN)?])的溶液中,在室温下孵育一段时间(通常是10-20分钟),形成普鲁士蓝沉淀。4. 复染:?为了更好地观察组织结构,通常会进行复染,例如使用苏木精染色(Hematoxylin)。5. 脱水、透明和封片:?用乙醇梯度脱水,然后用二甲苯透明处理,***用中性树胶封片。6. 显微镜观察:?在显微镜下观察染色后的切片,蓝色沉淀表示铁的存在。优点?特异性高:鲁士蓝染色对铁离子具有高度特异性,能够准确地检测和定位铁沉积。?操作简便:染色步骤相对简单,不需要复杂的仪器设备。?结果直观:染色后的铁沉积呈现明显的蓝色,易于观察和分析。南京刚果红染色Ki-67染色用于评估细胞增殖活性。
不同的染色方法可以达到不同的实验目的4.观察神经组织:?银染色:用于显示神经纤维和细胞外基质,适合神经组织的研究。5.检测特定蛋白质或抗原:?免疫组化染色:利用抗体与特定抗原结合,通过酶或荧光标记显示抗原位置,广泛应用于**研究和诊断。?免疫荧光染色:利用荧光标记的抗体与特定抗原结合,在荧光显微镜下观察,适用于研究细胞和组织中的特定蛋白质和分子。1.检测细胞增殖和凋亡:?Ki-67染色:用于检测细胞增殖。?TUNEL染色:用于检测细胞凋亡。1.研究血管生成:?CD31或VEGF染色:用于检测血管内皮细胞和血管生成相关蛋白。2.检测脂质和脂肪细胞:?油红O染色:用于检测脂质和脂肪细胞,常用于研究脂肪组织和代谢疾病。
病理染色方法主要分为两种:石蜡切片法和冰冻切片法。1.石蜡切片法:?原理:石蜡切片法通过将组织样本固定在石蜡中,以保持其微细结构。固定后的组织被切成极薄的切片,然后进行染色处理。?优点:这种方法能够提供高质量的组织切片,适合长期保存和详细的显微镜观察。它可以显示组织和细胞的形态结构,并通过不同的染色技术揭示细胞内的化学成分。?应用:石蜡切片法广泛应用于病理学研究和临床诊断,特别是在**诊断中,通过观察组织切片中的病变细胞,病理学家可以做出准确的诊断。1.冰冻切片法:?原理:冰冻切片法是在低温条件下快速冷却组织样本,使其达到一定硬度,然后进行切片。这种方法能够较好地保存细胞膜表面和细胞内的酶活性以及抗原的免疫活性。?优点:冰冻切片法制作过程快捷简便,适合需要快速诊断的情况。它能够在短时间内提供病理信息,帮助外科医生在手术过程中做出及时的决策。?应用:这种方法常用于手术中的快速病理诊断,通过快速制作和染色切片,病理学家可以在手术过程中提供即时的病理评估,指导手术操作。Giemsa染色广泛应用于血液涂片和骨髓涂片。
病理染色切片的读片及储存?显微镜观察区:配备了高性能的显微镜,如正置荧光显微镜带100倍油镜(Leica DM4000B)和尼康图像采集显微镜,供研究人员和病理学家对染色后的切片进行详细的观察和分析。这些显微镜不仅可以提供高分辨率的图像,还能进行荧光成像,适用于多种研究需求。?切片保存区:染色和封片后的切片会被存放在专门设计的储存柜中,以保持其完整性并便于未来的参考和使用。?试剂和耗材保存区:此区域用于存放实验所需的各类试剂和耗材,包括染料、缓冲液、抗体、封片剂等。良好的管理和储存条件是保证实验结果准确性的关键。Nissl染色用于显示神经元的尼氏体。南京维多利亚蓝染色结果分析
特殊染色技术用于检测特定细胞成分。南京刚果红染色
病理染色切片过程中值得注意的是1%伊红水溶液是理想的胞浆染液。要选择好水溶性的伊红染料使胞质鲜艳一些,切片不但漂亮且利于观片。(9)切片染色后的脱水要充分,每道乙醇脱水的时间不要过短,尤其是三道无水乙醇更为如此。无水乙醇要勤更换。(10)切片经***一次无水乙醇后尽快地放人二甲苯中。在夏季室内湿度较大的环境中更是如此。如切片在湿度大的空气中停留时间过长就会在封片时产生雾气,而不能现片。其原因是无水乙醇吸收了空气中的水汽,在二甲苯中难以分离析出,当用中性树胶封片后,二甲苯挥发,而水汽留在胶中产生雾气。(11)封片所使盖玻片需大小合适、清洁。树胶用量视盖玻片大小而定,要求不发生溢胶或缺如。(12)不提倡切片经无水乙醇,然后干燥,直接用中性树胶封固。这样会产生人为的细小黑点,与细胞核相似。(13)封片要在通风厨中进行,防止二甲苯污染工作间,危害技师的身体。南京刚果红染色